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細胞的分裂指數

 

一、原理:

體外培養細胞生長(cháng)、分裂繁殖的能力,可用分裂指數來(lái)表示。它與生長(cháng)曲線(xiàn)有一定的聯(lián)系,如隨著(zhù)分裂指數的不斷提高,細胞也就進(jìn)入了指數生長(cháng)期。分裂指數指細胞群體中分裂細胞所占的百分比,它是測定細胞周期的一個(gè)重要指標,也是不同實(shí)驗研究選擇細胞的重要依據。

二、儀器、用品與試劑

1、儀器與用品:CO2培養箱、普通顯微鏡、細胞培養血、蓋玻片、吸管
2
、試劑:培養液、胰酶、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液

三、操作步驟

1、消化細胞,將細胞懸液接至內含蓋玻片的培養皿中。
2
、CO2培養箱中培養48小時(shí),使細胞長(cháng)在蓋片上。
3
、取出蓋片,按下列順序操作:
PBS
漂洗3分鐘甲醇:冰醋酸=31固定液中固定30分鐘Giemsa液染色10分鐘自來(lái)水沖洗。
4
、蓋片晾干后反扣在載玻片上,鏡檢。
5
、計算:
分裂指數=分裂細胞數/總細胞數×100%

四、注意事項;

操作時(shí)動(dòng)作要輕,以免使蓋片上的細胞脫落。