1） 含量：>1x106 個(gè)/mL
2） 生長(cháng)特性：貼壁
3） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；（2）存活細胞，收到后應繼續生長(cháng)，傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現污染，請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途：僅供科研使用。
細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)，酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3） T25瓶中的培養基取出離心后，去上清，添加6ml新的完全培養基，重新加入原T25培養瓶。
4） 如果細胞長(cháng)滿(mǎn)90%請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代，傳代培養用本公司附帶的完全培養基。
大鼠肺微血管內皮細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 大鼠肺微血管內皮細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養，補加培養基至6ml。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
1. 將上清取出，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量完全培養基終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，和上清一起在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1:4比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為類(lèi)；
1，細胞凍存時(shí)，取出上清，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項：
1. 收到細胞后，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
