一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

1. 產(chǎn)品名稱(chēng)：人關(guān)節滑膜成纖維細胞

2. 組織來(lái)源：關(guān)節

3. 產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4. 細胞簡(jiǎn)介：

滑膜是關(guān)節囊的內層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結締組織組成。關(guān)節腔內的所有結構，除關(guān)節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過(guò)關(guān)節腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹?；し置诨?，在關(guān)節活動(dòng)中起重要作用。正?；し譃閮蓪?，即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層)，是血管豐富的關(guān)節囊內膜，貼附于非關(guān)節面部分，覆蓋于關(guān)節囊內的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱(chēng)為邊緣區或“裸區”?；こ史奂t色，光滑發(fā)亮、濕而潤滑，有時(shí)可見(jiàn)絨毛，內含膠原性纖維。
滑膜細胞有A、B兩型。巨噬細胞樣A型細胞，表面有絲狀偽足、漿膜內陷、囊泡、線(xiàn)粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體，具有吞噬功能；B型成纖維樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內質(zhì)網(wǎng)結構，是介導 RA 關(guān)節破壞的主要細胞。

本公司生產(chǎn)的人關(guān)節滑膜成纖維細胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽(yáng)性，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.推薦培養基：

我們推薦使用原代成纖維細胞培養體系作為體外培養人關(guān)節滑膜成纖維細胞的培養基。

二、細胞培養狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法 

在技術(shù)部標準操作流程下，人關(guān)節滑膜成纖維細胞可傳5~8代；建議您收到細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。 

客戶(hù)收到細胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。 

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態(tài)。 

2. 待細胞達到80%匯合時(shí)準備進(jìn)行傳代培養。 

3. 細胞傳代 

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次； 

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化； 

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養； 

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀(guān)察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。 

四、注意事項 

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。 

2. 在細胞培養過(guò)程中，請注意保持無(wú)菌操作。 

3. 傳代培養過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。 

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。 

5. 該細胞只可用于科研。 

 備注：由于實(shí)驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗室參考