產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠小腸黏膜上皮細胞 |
商品貨號 |
MZ-468 |
組織來(lái)源 |
正常小腸組織;小鼠 |
規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
生長(cháng)特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞描述 |
小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連。小腸與心互為表里。是食物消化吸收的主要場(chǎng)所,盤(pán)曲于腹腔內,上連胃幽門(mén),下接盲腸,全長(cháng)約5-6米,張開(kāi)有半個(gè)籃球大,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。其管壁由黏膜,黏膜下層,肌層和漿膜構成。其結構特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,黏膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |