| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
人胃癌組織源性原代成纖維細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4284 |
| 組織來(lái)源 |
中國成年病人手術(shù)后的胃癌組織。 |
| 規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
| 生長(cháng)特性 |
貼壁 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
胃癌組織源性微環(huán)境由功能性上皮、細胞外基質(zhì)和間質(zhì)細胞三部分組成。 腫瘤微環(huán)境主要包括： 1、微環(huán)境是細胞基因不穩定性的來(lái)源,可以誘發(fā)基因突變和DNA 損傷,并導致DNA 修 復通路失調； 2、許多有明確致癌作用的理化因素(慢性炎癥、化學(xué)致癌物等)是通過(guò)破壞微環(huán)境的組 織結構、改變間質(zhì)細胞因子表達譜并重塑細胞外基質(zhì),從而刺激功能細胞發(fā)生惡變的； 3、腫瘤細胞生長(cháng)、侵襲、轉移所需的氧、營(yíng)養成分和生長(cháng)刺激信號被認為是來(lái)自于周 圍的間質(zhì)細胞； 4、在適當的微環(huán)境中,惡性細胞可以被誘導恢復分化狀態(tài)； 5、細胞外基質(zhì)中存在的抗腫瘤成分,例如：腫瘤抑素(tumstatin)、內皮抑素(endostatin)； 間質(zhì)細胞主要包括成纖維細胞、各種免疫細胞和血管／淋巴管內皮細胞；此外,腫瘤細 胞還可以合成、分泌到細胞外間隙中新的基質(zhì)成分。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 主要功能 |
1、成纖維細胞組織微環(huán)境中主要的間質(zhì)細胞,也是產(chǎn)生間質(zhì)細胞(例如Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型膠 原與纖維連接蛋白)和組織蛋白酶的主要細胞,處于“基質(zhì)母細胞”的地位； 2、成纖維細胞是正常組織結構的“守護者”,存在抑制周?chē)掀ぜ毎l(fā)生惡變的機制, 已發(fā)生癌變的細胞在正常成纖維細胞環(huán)境下也可以向正常細胞分化； 3、成纖維細胞還是上皮細胞增生、分化的“調控者”,成纖維細胞發(fā)生轉化后可以表達 多種細胞因子、粘附分子直接作用于上皮細胞,促進(jìn)腫瘤細胞的發(fā)生、生長(cháng)、血管生成、浸 潤與轉移。 |
