| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
人膠質(zhì)瘤組織源性原代細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4282 |
| 組織來(lái)源 |
中國成年病人手術(shù)后的膠質(zhì)瘤組織。 |
| 規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
| 生長(cháng)特性 |
貼壁 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
神經(jīng)膠質(zhì)瘤來(lái)自神經(jīng)系統支持組織，屬外胚葉腫瘤，很多膠質(zhì)瘤其瘤細胞與成熟 的或未成熟的膠質(zhì)細胞相似。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分型 |
（1）星形細胞瘤 ①發(fā)生： 由星形細胞發(fā)生，占膠質(zhì)瘤中的半數以上，成年人多發(fā)生在大腦半球，小兒多發(fā)生在小 腦。其它如丘腦、腦干和脊髓均可發(fā)生，星形細胞瘤可分為纖維型和原漿型兩類(lèi)，腫瘤在腦 內呈浸潤性生長(cháng)，大小不一，可以侵犯1 個(gè)或2 個(gè)以上的腦葉，甚至經(jīng)胼胝體侵入對側大腦 半球。 ②大體形態(tài)： 纖維型星形細胞瘤比較硬韌，原漿型星形細胞瘤質(zhì)軟，?？梢?jiàn)有囊性變，瘤內出血和壞 死比較少見(jiàn)。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織由分化比較成熟的星形細胞組成，纖維型星形細胞瘤富于膠質(zhì)纖維，原漿型星形 細胞瘤富于細胞漿，若是星形細胞比較密集，細胞有異型性，且見(jiàn)絲狀核分裂像，血管內皮 細胞和外膜細胞增生，小灶狀出血和壞死，則稱(chēng)星形母細胞瘤，或稱(chēng)分化不良星形細胞瘤。 （2）多形性膠質(zhì)母細胞瘤 ①發(fā)生： 是成年人比較多見(jiàn)的惡性膠質(zhì)瘤，發(fā)生率僅次于星形細胞瘤，多發(fā)生在大腦半球，很少 發(fā)生在小腦。②大體形態(tài)： 腫瘤浸潤范圍比較大，可以侵犯幾個(gè)腦葉，或經(jīng)胼胝體侵犯對側大腦半球，腫瘤質(zhì)軟， 灰紅色，常出現大片出血和壞死區，瘤周?chē)M織顯著(zhù)水腫，甚至液化，出現假性分界，其實(shí) 瘤細胞浸潤范圍遠較肉眼所見(jiàn)廣泛得多。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細胞分化不成熟，多形性，異型性，有較多核分裂像，常出現單核和多核瘤巨細胞。 血管內皮細胞和外膜細胞顯著(zhù)增生，血管腔內有血栓形成，散在大片出血和壞死，分化 不良星形母細胞瘤沒(méi)有明確的區。 （3）少突膠質(zhì)細胞瘤和少突膠質(zhì)母細胞瘤 ①發(fā)生： 由少突膠質(zhì)細胞發(fā)生，患者多是中年人，也可見(jiàn)于兒童，主要發(fā)生在大腦半球白質(zhì)內。 ②大體形態(tài)： 腫瘤質(zhì)軟，灰紅色，界限不清，常有鈣化和囊性變。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細胞形態(tài)比較一致，胞核圓形，深染，核周胞漿因水腫而顯空白，間質(zhì)少，常見(jiàn)鈣化 灶和囊腫形成若是瘤細胞大小、形態(tài)、核染色性不一致，并出現巨瘤細胞，具有核分裂像， 血管內皮細胞增生，有出血和壞死，則稱(chēng)少突膠質(zhì)母細胞瘤。 （4）室管膜瘤和室管膜母細胞瘤 ①發(fā)生 常和腦室壁和中央管有聯(lián)系，多見(jiàn)于第四腦室、側腦室和脊髓內，患者多為幼兒和青年 人。 ②大體形態(tài)： 腫瘤灰紅色，質(zhì)軟，多呈結節狀突于腦室腔內或位于腦或脊髓實(shí)質(zhì)內。 ③顯微鏡下形態(tài)：室管膜瘤分為上皮型、乳頭型、乳頭粘液型和細胞型四種。（5）混 合性膠質(zhì)瘤 腫瘤是由兩種或者兩種以上的膠質(zhì)瘤類(lèi)型所組成，各占相當的分量，這種膠質(zhì)瘤多見(jiàn)于 小兒，可見(jiàn)于小腦及大腦內，肉眼觀(guān)察與一般膠質(zhì)瘤形態(tài)無(wú)異，需依靠組織學(xué)檢查來(lái)診斷。 （6）髓母細胞瘤 ①發(fā)生 是小兒顱內較常見(jiàn)的惡性腫瘤，主要發(fā)生在小腦蚓部，可突入第四腦室內，亦可侵入周 圍組織，常沿腦脊液呈種植性播散。 ②大體形態(tài)： 腫瘤紫紅色，粘凍狀，與腦實(shí)質(zhì)之間界限不清，出血壞死少見(jiàn)。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細胞密集，間質(zhì)少，瘤細胞小，胞核園形或橢圓形，深染，胞漿少，核分裂像多 見(jiàn)，細胞常呈假菊花形排列，如腫瘤侵及軟膜，常伴有纖維結締組織的明顯增生。 （7）脈絡(luò )叢乳頭狀瘤 ①發(fā)生 由腦室內脈絡(luò )叢發(fā)生，好發(fā)于第四腦室和側腦室可經(jīng)第四腦室側孔突入小腦橋腦角 內生長(cháng)。②大體形態(tài)：腫瘤呈粉紅色，質(zhì)軟，表面呈絨毛狀，常見(jiàn)有鈣化。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織呈乳頭樣結構，外覆蓋著(zhù)分化良好的上皮細胞，可有鈣化或砂粒小體形成， 其惡性類(lèi)型稱(chēng)脈絡(luò )叢乳頭狀癌。 ①發(fā)生 比較少見(jiàn)，多發(fā)生在青年人，常見(jiàn)在第三腦室后部，即松果體部位。 ②大體形態(tài)： 腫瘤灰紅色，球形，無(wú)包膜形成。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織由單一的上皮樣細胞組成，胞體大小中等，核圓或橢圓形，含較多染色質(zhì)而 深染，大多沒(méi)有核仁，胞漿淡而界線(xiàn)不清，分布于纖維組織所形成的間質(zhì)中，一般無(wú)核分裂 像，松果體母細胞瘤則由較密集的小細胞組成，其分化程度低，細胞核小而密集，胞漿稀少, 染色極深 |
