| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
人宮頸癌組織源性原代細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4280 |
| 組織來(lái)源 |
中國成年病人手術(shù)后的宮頸癌組織。 |
| 規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
| 生長(cháng)特性 |
貼壁 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
鱗狀上皮細胞癌，約占90％～95％。 腺癌僅占5％～10％ |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分型 |
1、目觀(guān)在發(fā)展為浸潤癌前，肉眼觀(guān)察無(wú)特殊異常，或類(lèi)似一般宮頸糜爛。隨著(zhù)浸潤癌的 出現，宮頸可表現以下四種類(lèi)型： （1）糜爛型：環(huán)繞宮頸外口表面有粗糙的顆粒狀糜爛區，或有不規則的潰破面、觸及易出 血。 （2）外生型：又稱(chēng)增生型或菜花型。由息肉樣或乳頭狀隆起，繼而發(fā)展向陰道內突出的大 小不等的菜花狀贅生物，質(zhì)脆易出血。 （3）內生型：又稱(chēng)浸潤型。癌組織宮頸深部組織浸潤、宮頸肥大而硬，但表面仍光滑或僅 有淺表潰瘍。 （4）潰瘍型：不論外生型或內生型進(jìn)一步發(fā)展后，癌組織壞死脫落，形成潰瘍，甚至整個(gè) 子宮頸為一大空洞所替代，因常有繼發(fā)性感染，故有惡臭的分泌物排出。子宮頸癌尤其是腺 癌也可向頸管內生長(cháng)，使子宮頸成桶狀增大，這也是內生型的一種。 2、鏡查 （1）不典型增生：不典型增生表現為底層細胞增生，底層細胞不但增生，而且有細胞排列 紊亂及細胞核增大、濃染、染色質(zhì)分布不均等核異質(zhì)改變。 ①輕度不典型增生(間變I 級)：上皮細胞排列稍紊亂，細胞輕度異型性，異型上皮占據上皮 層的下三分之一。②中度不典型增生(間變Ⅱ級)：上皮細胞排列紊亂，異型性明顯，異型上皮占據上皮層的下 三分之二。 ③重度非典型增生(間變Ⅲ級)：幾乎全部上皮極性紊亂或極性消失，細胞顯著(zhù)異型性和原位 癌已不易區別。 （2）原位癌：又稱(chēng)上皮內癌。上皮全層極性消失，細胞顯著(zhù)異型，核大，深染，染色質(zhì)分 布不均，有核分裂相。但病變仍限于上皮層內，未穿透基底膜，無(wú)間質(zhì)浸潤。異型細胞還可 沿著(zhù)宮頸腺腔開(kāi)口進(jìn)入移行帶區的宮頸腺體，致使腺體原有的柱狀細胞為多層異型鱗狀細胞 所替代，但腺體基底膜仍保持完整，這種情況稱(chēng)為宮頸原位癌累及腺體。 （3）鏡下早期浸潤癌：鏡下早期浸潤癌在原位癌基礎上，偶然可發(fā)現有癌細胞小團已穿破 基底膜，似淚滴狀侵入基底膜附近的間質(zhì)中，浸潤的深度不超過(guò)5mm，寬不超過(guò)7mm，也 無(wú)癌灶互相融合現象，也無(wú)侵犯間質(zhì)內脈管跡象時(shí)，臨床上無(wú)特征。 （4）鱗狀上皮浸潤癌：當癌細胞穿透上皮基底膜，侵犯間質(zhì)深度超過(guò)5mm，稱(chēng)為鱗狀上皮 浸潤癌。在間質(zhì)內可出現樹(shù)枝狀、條索狀，彌漫狀或團塊狀癌巢。 ①I(mǎi) 級：分化好。癌巢中有相當數量的角化現象，可見(jiàn)明顯的癌珠。 ②Ⅱ級：中等分化(達宮頸中層細胞的分化程度)，癌巢中無(wú)明顯角化現象。 ③Ⅲ級：未分化的小細胞(相當于宮頸底層的未分化細胞)。 （5）腺癌：腺癌來(lái)源于被覆宮頸管表面和頸管內腺體的柱狀上皮。鏡檢時(shí)，可見(jiàn)到腺體結 構，甚至腺腔內有乳頭狀突起。腺上皮增生為多層，細胞低矮，異型性明顯，可見(jiàn)核分裂相。 如癌細胞充滿(mǎn)腺腔，以致找不到原有腺體結構時(shí)，往往很難將腺癌與分化不良的鱗癌區別。 如腺癌與鱗癌并存時(shí)稱(chēng)為宮頸腺、鱗癌。腺、鱗癌惡性程度高，轉移早、預后差。 |
