| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠腎足細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-3911 |
| 組織來(lái)源 |
正常腎臟組織；小鼠 |
| 規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
| 生長(cháng)特性 |
貼壁 |
| 細胞形態(tài) |
梭形、多角形 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
腎小球為血液過(guò)濾器，腎小球毛細血管壁構成過(guò)濾膜。腎小球過(guò)濾膜從內到外有三層結構：內層為內皮、中層為腎小球基膜、外層為上皮細胞層，上皮細胞又稱(chēng)足細胞，其不規則突起稱(chēng)足突，其間有許多狹小間隙，血液經(jīng)濾膜過(guò)濾后，濾液入腎小球囊。在正常情況下，血液中絕大部分蛋白質(zhì)不能濾過(guò)而保留于血液中，僅小分子物質(zhì)如尿素、葡萄糖、電解質(zhì)及某些小分子蛋白能濾過(guò)。 腎足細胞即腎小球上皮細胞，它附著(zhù)于腎小球基底膜的外側，連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構成了腎小球血液濾過(guò)屏障。又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養的原代細胞不能增殖。 足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，呈指狀交叉覆蓋于腎小球基底膜外表面，并通過(guò)黏附分子和蛋白多糖分子與腎小球基底膜相連。足細胞在正常情況下可以分泌腎小球基底膜的主要組成成分IV型膠原和纖維連接蛋白,在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解腎小球基底膜作用的基質(zhì)金屬蛋白酶和組織蛋白酶，從而在腎小球基底膜的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
