培養基說(shuō)明 |
人胚胎干細胞和誘導多能干細胞具有分化成外胚層所有細胞的能力,包括神經(jīng)干細胞。人多能干細胞分化的神經(jīng)干細胞被用與研究神經(jīng)系統發(fā)展,神經(jīng)系統疾病建模,神經(jīng)毒理學(xué)和藥物篩選。 SMAD信號在神經(jīng)誘導起關(guān)鍵作用。SMAD信號的雙重影響,Noggin和SB431542充分的誘導hPSC完全、快速的轉變?yōu)樯窠?jīng)細胞。[1].2010年李文林和他的同事發(fā)現glycogen synthase kinase 3 (GSK3) 和 transforming growth factor (TGF-β)的協(xié)同抑制作用,可有效地使hPSC在7天內轉化為同質(zhì)神經(jīng)上皮。[2].分化的神經(jīng)干細胞可以在人白血病抑制因子、GSK3和TGF-β的作用下實(shí)現自我更新。神經(jīng)干細胞有分化為多種神經(jīng)細胞和神經(jīng)膠質(zhì)亞形的能力,通過(guò)特殊的誘導。 基于先進(jìn)的神經(jīng)細胞分化理論,我們開(kāi)發(fā)了多能干細胞誘導神經(jīng)干細胞培養基,該培養基為無(wú)血清培養基,在貼壁培養條件下可以高效的使hPSCs轉化為NSCs。hPSCs在神經(jīng)誘導培養基下可以轉化為同源神經(jīng)上皮。用PSCNIM處理7~10天,90%以上的細胞表達神經(jīng)干細胞標記物質(zhì):Nestin 和Sox2;同時(shí)多能干細胞標志物Nanog的表達消失。來(lái)源于hPSC的NSCs可以在誘導培養基里培養至少5段(大概24天),能明顯形成花環(huán)狀,并在含有EGF和FGF的培養基擴展為神經(jīng)前體細胞,或誘導分化為神經(jīng)細胞血統的神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞。 |