一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

1. 產(chǎn)品名稱(chēng)：人牙周膜成纖維細胞

2. 組織來(lái)源：牙周膜組織

3. 產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4. 人牙周膜成纖維細胞簡(jiǎn)介：

人牙周膜成纖維細胞分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶、牙周間隙）是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束，纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內，另一端則埋于牙槽窩骨壁里，使牙齒固位于牙槽窩內；牙周膜內有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細胞分化而來(lái)。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動(dòng)旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著(zhù)十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(cháng)，不聚集成團；細胞生長(cháng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長(cháng)，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。人牙周膜成纖維細胞（PLFs）作為牙周膜的主體細胞，是牙周膜主要的間質(zhì)細胞，它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與了牙周組織的病變、修復及再生過(guò)程?，F在，利用牙周膜細胞建立體外模型，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。明舟生物生產(chǎn)的人牙周膜成纖維細胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5. 培養基信息：

DMEM[H]、FBS、成纖維細胞生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 我們推薦使用人牙周膜成纖維細胞專(zhuān)用完全培養基（產(chǎn)品貨號：CM-H136）作為體外培養人牙周膜成纖維細胞的培養基。

二、細胞培養狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

在技術(shù)部標準操作流程下，人牙周膜成纖維細胞可傳3-5代左右，隨著(zhù)傳代次數的增加，細胞會(huì )呈現老化狀態(tài)，生長(cháng)速度減緩，3代以?xún)燃毎麪顟B(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。

客戶(hù)收到細胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時(shí)準備進(jìn)行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀(guān)察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細胞培養過(guò)程中，請注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和明舟生物聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便明舟生物的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。

5. 該細胞只可用于科研。

備注：由于實(shí)驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗室參考