2. 組織來(lái)源:肝外膽管組織
3. 產(chǎn)品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
4. 細胞簡(jiǎn)介:
小鼠肝外膽管上皮細胞分離自肝外膽管組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著(zhù)去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見(jiàn)的膽管病變如膽道閉鎖、先天性膽總管囊腫、原發(fā)性硬化性膽管炎等,都是以膽管上皮
細胞為病變的靶位,引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮
細胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮
細胞的病理生理學(xué)特征對研究膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。
明舟生物(mingzhoubio)生產(chǎn)的
小鼠肝外膽管上皮細胞采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中,通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),
細胞總量約為5×105cells/瓶;
細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5. 培養基信息:
M199、FBS、上皮細胞生長(cháng)添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
客戶(hù)收到
細胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25
細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的
細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態(tài)。
2. 待
細胞達到80%匯合時(shí)準備進(jìn)行傳代培養。
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗
細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待
細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4) 待
細胞完全貼壁后,培養觀(guān)察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在
細胞培養過(guò)程中,請注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張
細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸的原因,個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知
細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。
備注:由于實(shí)驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗室參考