人卵巢癌細胞胞(CoC1)介紹

人卵巢癌細胞胞(CoC1)建系于1993 年（熊世鋼等）。細胞于原代培養至第17 天首次傳代，以后反復傳代，生物學(xué)特性穩定?？杀磉_多種腫瘤標志物和野生型P53 蛋白、突變型P53 蛋白。裸鼠接種產(chǎn)生分化差的腺癌。

人卵巢癌細胞胞(CoC1)特性：

1） 來(lái)源：卵巢癌

2） 形態(tài)：圓形或橢圓形，懸浮生長(cháng)

3） 含量：>1x106 個(gè)/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25 瓶或者1mL 凍存管包裝

運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續生長(cháng)，傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。

人卵巢癌細胞胞(CoC1)用途：僅供科研使用。

人卵巢癌細胞胞(CoC1)培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37 攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%完全培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

二．細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL 細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL 培養基混合均勻。在1000RPM 條件下離心4 分鐘，棄去上清液，補加1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入10cm 皿中，加入約8ml 培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM 條件下離心4 分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2 到1：3 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。懸浮細胞凍存時(shí)，應將細胞收集，1000RPM 條件下離心4 分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

注意事項：

1. 收到細胞后，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

2. 所有動(dòng)物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。