一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

1. 產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠肺血管平滑肌細胞

2. 產(chǎn)品編號：MZ-M0183

2. 組織來(lái)源：肺組織

3. 產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4. 細胞簡(jiǎn)介：大鼠肺血管平滑肌細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱(chēng)喉為肺之門(mén)戶(hù)，鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見(jiàn)細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長(cháng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng)，高低起伏；細胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。肺血管平滑肌細胞主要功能：①細胞表面表達介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應；②是多數重要動(dòng)脈疾病的靶細胞。大鼠肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓；②先天性肺動(dòng)脈狹窄；③肺動(dòng)脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長(cháng)潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素，最新研究表明肺血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發(fā)展及穩定性有關(guān)。

明舟生物生產(chǎn)的大鼠肺血管平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái)，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5. 培養基信息：

DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

我們推薦使用大鼠肺血管平滑肌細胞專(zhuān)用完全培養基作為體外培養大鼠肺血管平滑肌細胞的培養基。

二、使用方法：

在明舟生物技術(shù)部標準操作流程下，大鼠肺血管平滑肌細胞可傳8代左右，隨著(zhù)傳代次數的增加，細胞會(huì )呈現老化狀態(tài)，生長(cháng)速度減緩，4代以?xún)燃毎麪顟B(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。

三、產(chǎn)品的運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，明舟生物與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)   1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進(jìn)行培養，如無(wú)法立刻進(jìn)行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)   T-25培養瓶充滿(mǎn)完全培養基后進(jìn)行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

四. 細胞傳代

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀(guān)察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

五、注意事項：

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細胞培養過(guò)程中，請注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和明舟生物技術(shù)部溝通；由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。

5. 該細胞只可用于科研