第二節 內皮細胞培養

  內皮細胞易于從大血管分離培養成單層細胞，對于研究?jì)绕ぜ毎偕?、腫瘤促血管生長(cháng)因子（TAF）等有很大價(jià)值。

  研究人內皮細胞培養以人臍帶靜脈灌流消化法最為簡(jiǎn)便，其法如下：

1、產(chǎn)后新鮮臍帶，無(wú)菌剪取10—15厘米長(cháng)一段，如不能立即培養，可于12小時(shí)內保存于4℃。
2、用三通注射器吸取溫PBS液注入臍靜脈中洗去殘血，在入口處用線(xiàn)繩扎緊，以防液體返流。
3、用血管鉗夾緊臍帶一端，從另一端向臍靜脈中徐徐注入終濃度為0.1%的粗制膠原酶，充滿(mǎn)血管，消化3—10分鐘；注入口用線(xiàn)繩扎，以防液體返流。
4、吸出含有內皮細胞的消化液，于離心管中，注入溫PBS輕輕反復沖洗后，一并注入離心管中（此步驟可重復）。
5、離心去上清，加入RPMI1640培養液制成細胞懸液，接種入培養器皿中，置溫箱培養。兩至三天可見(jiàn)細胞長(cháng)成單層。