細胞懸液制備后，需要計算懸液中所含細胞數量；一般以細胞數/mL 表示。因只有健康的細胞才有活力，接種后能夠生長(cháng)增殖，所以在接種關(guān)應先檢查一下細胞的活力。
（1） 計數板
用 96% 酒精沖洗計數板后，用干凈鹿皮擦凈，另擦凈蓋片一張；把蓋片覆在計數板上面，使之微微移向一側，露出計數板臺面少許，以便滴加細胞懸液。
（2） 染色
取吸管 1 支，伸入培養瓶中，輕輕反復吹打細胞懸液使細胞重懸均勻后，立即吸細胞懸液少許，向另一離心管中滴入細胞懸液 9 滴，再滴入臺盼藍染液 1 滴，混勻，置 2~3 分鐘。
（3） 加懸液
把計數板平放在顯微鏡臺上，立即從計數板邊緣輕輕滴 1~2 滴已染色的細胞懸液，使之充滿(mǎn)計數板和蓋片間空隙中。
（4） 鏡檢
鏡下觀(guān)察可見(jiàn)細胞分散各處，健康細胞胞體完整，透明不著(zhù)色，凡著(zhù)色細胞均為不健康者。計算四角大方格內的細胞數；壓中線(xiàn)者只計算左線(xiàn)和上線(xiàn)者，右線(xiàn)和下線(xiàn)不計算在內（即僅計算壓兩個(gè)邊的細胞）。
（5） 接種
培養通過(guò)計數測知懸液中細胞數后，可根據實(shí)驗所需細胞數量向培養容器中接種。細胞接種數量隨實(shí)驗目的、血清含量和細胞生物性狀而定；一般接種量在 1~10 × 105 細胞/mL 范圍，實(shí)驗周期短，希望細胞增殖較快時(shí)，接種量可大些。用含血清量大的培養液培養胚胎來(lái)源細胞、無(wú)限細胞系和惡性細胞系時(shí)，細胞接種數量不宜太大。
（1） 向計算板中滴細胞懸液時(shí)要干凈利落，勿令液面蓋過(guò)蓋片，加量要適當，過(guò)多易使蓋片漂移，過(guò)少易出現氣泡，不理想時(shí)應重做。
（2） 鏡下計數時(shí)，偶見(jiàn)有由兩個(gè)以上組成的細胞團，應按單個(gè)細胞數計算，如細胞團數占 10% 以上，說(shuō)明消化不充分；功細胞數少于 200 個(gè) / 10 mm2 或多于 500 個(gè) / 10 mm2 時(shí)，均說(shuō)明稀釋不當，需重新制備細胞懸液，再重計數。
（3） 經(jīng)常使用同一細胞在相同條件下工作時(shí)，對各種情況已做到心中有數情況下，可略去某些環(huán)節，如染色檢查等；計算板計算細胞數法有一定誤差，用作測定細胞生長(cháng)曲線(xiàn)時(shí)，每一樣品應重復計算 4 次，取均值，較為可靠，若有電子細胞計數儀器當然更好。
（4） 體外培養細胞在懸液中呈圓形，平均直徑 8~10 μm，當被接種到底物上生長(cháng)時(shí)，經(jīng)過(guò)延展后，則呈扁形，在底物上所占的面積按直徑算可達 20~25 μm，則 1 cm2 的底物上可容納 4~5 萬(wàn)個(gè)這樣的細胞，這是理論上的數值，但在實(shí)際應用中，當細胞達到 80 % 匯合狀態(tài)時(shí)便應做傳代處理，因此細胞數量比上述理論數量少。
