準備工作
一、制定培養方案
當我們準備培養一個(gè)菌株之前,首先要了解這個(gè)菌株的生長(cháng)特性,確定該菌株的營(yíng)養需求、生長(cháng)溫度、氣體環(huán)境、滲透壓、酸堿度及嗜鹽性等條件,選擇合適的培養基和培養環(huán)境,制定活化培養方案。通常購買(mǎi)的菌株都附帶說(shuō)明書(shū),按照說(shuō)明書(shū)推薦的培養基和培養條件來(lái)準備。若沒(méi)有說(shuō)明書(shū),可通過(guò)查閱文獻(推薦查看伯杰細菌手冊或常見(jiàn)細菌鑒定手冊)等方式確認菌株的生長(cháng)條件,再制定方案。
二、菌株處理
獲得菌株后,原則上應盡早進(jìn)行活化和保存。若不能立即活化,應按照說(shuō)明書(shū)放入相應的環(huán)境中進(jìn)行保存。若菌株為厭氧菌,請按厭氧菌培養要求在厭氧環(huán)境中操作。
(1)若保存的菌株為凍干粉形式,可加入少量生理鹽水或非選擇性肉湯培養基進(jìn)行溶解懸浮,用劃線(xiàn)或涂布方式接種至平板,或著(zhù)吸取菌液至液體培養基中進(jìn)行培養。
(2)若保存的菌株為甘油凍存或液體保存形式,可在室溫速融后劃線(xiàn)或涂布接種至平板,或直接加入到液體培養基中進(jìn)行培養。
(4)若保存的菌株為斜面或半固體形式,可直接挑取菌苔轉接至平板或液體培養基中進(jìn)行培養。
三、活化菌株使用的培養基的成分通常包括以下幾個(gè)組分:
(1)基本營(yíng)養成分,如蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉等,主要提供碳源、氮源及微量元素等;
(2)氯化鈉:維持一定的滲透壓環(huán)境;
(3)磷酸鹽:維持pH的相對穩定;
(4)特殊成分:如血清、半胱氨酸、氯化血紅素等,促進(jìn)特定菌的生長(cháng)。
根據菌株的生長(cháng)特性,選擇合適的培養基或對特定的培養基添加成分進(jìn)行改良,以滿(mǎn)足菌株的生長(cháng)需求