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根瘤菌的共生過(guò)程與主要用途!

根瘤菌Rhizobium)主要指與豆類(lèi)作物根部共生形成根瘤并能固氮的細菌,一般指根瘤菌屬和慢生根瘤菌屬;兩屬都屬于根瘤菌目。
根瘤菌細胞呈桿狀,有鞭毛和莢膜,鞭毛為正常的活動(dòng)器官,無(wú)芽孢,革蘭氏染色陰性,屬需氧型。在根瘤中生活的菌體形式多種多樣,有梨形、棍棒型或T、X、Y等型,這種變形的菌體成為類(lèi)菌體;類(lèi)菌體在豆科植物體內不生長(cháng)繁殖,卻能與豆科植物共同固氮,對豆科植物有良好作用。
根瘤菌侵入寄主根內,刺激根部皮層和中柱鞘的某些細胞,引起這些細胞的強烈生長(cháng),使根的局部膨大形成根瘤;根瘤菌在根內定居,植物供給根瘤菌以礦物養料和能源,根瘤菌固定大氣中游離氮氣,為植物提供氮素養料,兩者在拮抗寄生關(guān)系中處于均衡狀態(tài)而表現共生現象。
中國地域遼闊豆科作物種類(lèi)繁多,每年大面積種植花生、大豆、豌豆、蠶豆、綠豆及苜蓿、沙打旺等豆科牧草幾十種之多。根瘤菌接種技術(shù)在豆科作物種植中的作用是其他任何技術(shù)措施無(wú)法替代的。 
一、簡(jiǎn)介
經(jīng)過(guò)70年代和80年代初的研究,根瘤菌科的變化較大,現包括7屬36種,但其中的放射土壤桿菌不能引起植物異常增生。根瘤菌屬和慢生根瘤菌屬 兩屬細菌都能從豆科植物根毛侵入根內形成根瘤,并在根瘤內成為分枝的多態(tài)細胞,稱(chēng)為類(lèi)菌體。類(lèi)菌體在根瘤內不生長(cháng)繁殖,卻能與豆科植物共生固氮,對豆科植物生長(cháng)有良好作用。這兩屬細菌的表現性狀極相似,只是根瘤菌屬的細菌在酵母膏、甘露醇、無(wú)機鹽瓊脂上生長(cháng)快,3~5天的菌落直徑可達2~4毫米;在含碳水化合物的培養基上產(chǎn)酸。慢生根瘤菌屬的細菌卻與之相反,菌落生長(cháng)甚慢,5~7天其直徑還不足1毫米,在含碳水化合物的培養基上不產(chǎn)酸,反而呈堿性。
根瘤菌屬是于1889年由B.弗蘭克建立的,它包括3種:豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌和百脈根瘤菌。慢生根瘤菌屬是D.C.喬丹于1982年從根瘤菌屬中分化出來(lái)的,屬內暫有一種,即曾經(jīng)稱(chēng)為大豆根瘤菌的大豆慢生根瘤菌。上述兩屬細菌時(shí)常制成細菌制劑在田間施用,作為作物或牧草增產(chǎn)的一種手段(見(jiàn)固氮微生物)。 土壤桿菌屬 1942年由H.J.康恩建立。其性狀與前述兩屬的根瘤細菌頗相似,但不能在豆科植物根上形成能共生固氮的根瘤。本屬細菌能夠通過(guò)外傷入侵多種雙子葉植物和裸子植物,致使植物細胞轉化為異常增生的腫瘤細胞,產(chǎn)生根癌、毛根和桿癭等病狀。土鑲桿菌屬內各個(gè)種誘發(fā)根癌的能力與其所特有的Ti質(zhì)粒有關(guān)。本屬細菌為土傳性植物病原菌。葉桿菌屬 1984年D.H.克內澤爾發(fā)表的1屬細菌。其表現性狀與前述3屬相近,特點(diǎn)是在紫金??坪蛙绮菘浦心承釒ХN的葉片上形成共生葉瘤。細菌在葉瘤內也呈多態(tài),但是否能共生固氮還沒(méi)能斷定。共有兩個(gè)種:紫金牛葉桿菌和茜草葉桿菌。
現代的分類(lèi)手段,如DNA堿基組成、DNA同源性、rRNA順?lè )醋酉嗨菩?、蛋白凝膠電泳、數值分類(lèi)等結果,都證明土壤桿菌與兩屬根瘤菌有一定的親緣關(guān)系,也證明將根瘤細菌分為兩屬是符合客觀(guān)實(shí)際的。rRNA順?lè )醋酉嗨菩缘难芯拷Y果證明葉桿菌屬與前3屬有一定關(guān)系,所以暫歸屬于根瘤菌科。
二、生存習性
這種共生體系具有很強的固氮能力。已知全世界豆科植物近兩萬(wàn)種。根瘤菌是通過(guò)豆科植物根毛、側根杈口(如花生)或其他部位侵入,形成侵入線(xiàn),進(jìn)到根的皮層,刺激宿主皮層細胞分裂,形成根瘤,根瘤菌從侵入線(xiàn)進(jìn)到根瘤細胞,繼續繁殖,根瘤中含有根瘤菌的細胞群構成含菌組織。根瘤菌進(jìn)入這些宿主細胞后被一層膜套包圍,有些菌在膜套內能繼續繁殖,大量增加根瘤內的根瘤菌數,以后停止增殖,成為成熟的類(lèi)菌體;宿主細胞與根瘤菌共同合成豆血紅蛋白,分布在膜套內外,作為氧的載體,調節膜套內外的氧量。類(lèi)菌體執行固氮功能,將分子氮還原成NH3,分泌至根瘤細胞內,并合成酰胺類(lèi)或酰尿類(lèi)化合物,輸出根瘤,由根的傳導組織運輸至宿主地上部分供利用。與宿主的共生關(guān)系是宿主為根瘤菌提供良好的居住環(huán)境、碳源和能源以及其他必需營(yíng)養,而根瘤菌則為宿主提供氮素營(yíng)養。
三、共生過(guò)程
當豆科植物在幼苗期,土壤中的根瘤菌便被其根毛分泌的有機物吸引而聚集在根毛的周?chē)?,并大量繁殖。同時(shí)產(chǎn)生一定的分泌物,這些分泌物刺激根毛,使其先端卷曲和膨脹,同時(shí),在根菌瘤分泌的纖維素酶的作用下,根毛細胞壁發(fā)生內陷溶解,隨即根瘤菌由此侵入根毛。 在根毛內,根瘤菌分裂滋生,聚集成帶,外面被一層粘液所包,形成為感染絲,并逐漸向根的中軸延伸。同時(shí),在根瘤菌的刺繳下,根細胞相應地分泌出一種纖維素,包圍于感染絲之外,形成了具有纖維素鞘的內生管,又稱(chēng)侵入線(xiàn)。根瘤菌順侵入線(xiàn)進(jìn)入幼根的皮層中。
在皮層內,根瘤菌迅速分裂繁殖,皮層細胞受到根瘤菌侵入的刺繳,也迅速分裂,產(chǎn)生大量的新細胞。致使皮層出現局部的膨大。這種膨大的部分,包圍著(zhù)聚生根瘤菌的薄壁組織,從而形成了外向突出生長(cháng)的根瘤。
之后,含有根瘤菌的薄壁細胞的細胞核和細胞質(zhì)逐漸被根瘤菌所破壞而消失,根瘤菌相應地轉為擬菌體(bacterioid)。
主根瘤菌剛剛進(jìn)入豆科植物根部的時(shí)候,并不能固氮,只能發(fā)展到擬菌體階段,才能進(jìn)行固氮作用。
在根瘤內,根瘤菌從豆科植物根的皮層細胞中吸取碳水化合物、礦質(zhì)鹽類(lèi)及水分。以進(jìn)行生長(cháng)和繁殖。同時(shí)它們又把空氣中游離的氮通過(guò)固氮作用固定下來(lái),轉變?yōu)橹参锼芾玫暮衔?,供植物生活所需。這樣,根瘤菌與根便構成了互相依賴(lài)的共生關(guān)系。
由于根菌瘤在生活過(guò)程中分泌一些有機氮到土壤中,加之,根瘤在植物的生長(cháng)末期會(huì )自行脫落,從而大大提高了土壤的肥力。據估測,一畝苜蓿年均可積累40斤氮肥,相當于200斤硫銨。并可增加土壤中的腐殖質(zhì)。
由于有些土壤中沒(méi)有與豆科植物共生的根瘤菌,同時(shí)不同豆科植物需要與不同類(lèi)型的根瘤菌共生,因此在農業(yè)上采取在播種豆科植物時(shí),將其與根瘤菌制劑攪抖,以便給豆科作物形成根瘤創(chuàng )造條件。據調查,采用該方法播種,可使大豆、花生增產(chǎn)10%以上。
四、主要用途
雖然空氣成分中約有80%的氮,但一般植物無(wú)法直接利用,花生、大豆、苜蓿等豆科植物,通過(guò)與根瘤菌的共生固氮作用,才可以把空氣中的分子態(tài)氮轉變?yōu)橹参锟梢岳玫陌睉B(tài)氮。在種子發(fā)芽生根后,根瘤菌從根毛入侵根部,在一定條件下,形成具有固氮能力的根瘤,在固氮酶的作用下,根瘤中的類(lèi)菌體將分子態(tài)氮轉化為氨態(tài)氮,與此同時(shí),每個(gè)根瘤就是一座微型氮肥廠(chǎng),源源不斷地把氮輸送給植株利用。豆科作物周?chē)耐林?zhù)根瘤菌數量很少,難以滿(mǎn)足作物生長(cháng)的需要。世界上的豆科作物都需要人工接種根瘤菌劑,根瘤菌劑給農作物生產(chǎn)的氮肥不會(huì )有環(huán)境污染,不需長(cháng)途運輸,使用過(guò)程中沒(méi)有氮流失,而人工施用化學(xué)氮肥流失率往往大于50%。 當豆科作物萌發(fā)并長(cháng)出根毛后,根瘤菌受根毛分泌的凝集素的刺激和吸引,大量聚集在根際和根表上。根毛與根瘤菌接觸后,首先是細胞壁變軟,發(fā)生根毛卷曲,然后是細胞壁內陷,根瘤菌隨之侵入根毛,直至根的皮層,根瘤菌在皮層大量繁殖并轉變?yōu)轭?lèi)菌體,此時(shí)根部皮層大量增生,形成瘤狀組織,最后突出根部形成根瘤,當有效根瘤的剖面呈粉紅色時(shí),說(shuō)明根瘤進(jìn)入成熟階段,開(kāi)始固氮,并向植株提供氮素。人工接種結瘤固氮性能優(yōu)良的根瘤菌來(lái)提高共生固氮效率。